树舌灵芝成分分析 树舌的化学成分包括多糖、甾体化合物、三萜、脂类、氨基酸、多肽、蛋白质类、 生物硷类、酚类、内酯、香豆素类、鞣质、含氧杂环、蒽醌类和甙类以及微量元素 等。 树舌灵芝具有广泛的药理活性,主要包括调节机体免疫系统、抗肿瘤、抗病毒、消 炎抗菌、降血糖、调节血压、阻碍血小板凝集和强心作用。临床用于治疗腹水癌、 神经系统疾病、肝炎、心脏病、糖尿病和糖尿病并发症,预防和治疗胃溃疡、急慢 性胃炎、十二指肠溃疡、胃酸过多等胃病,具有较高的药用价值。
【参考文献】-摘要 1、树舌灵芝MP-01发酵液生物硷提取物成分分析及抗肿瘤活性研究 作者:梁大勇 刘海良 田雪梅 宋爱荣 -山东省应用真菌重点实验室(青岛农业大学 ),青岛 发表:中国菌物学会第三届药用真菌学术研讨会-2011年5月20日 摘要:树舌灵芝Ganoderma lipsiense(Pers.)Pat.属于担子菌门,层菌纲,非褶菌 目,灵芝科,灵芝属。树舌具有清热、消积、化痰、止痛、抗癌等功效,多用于乙型 肝炎、食道癌、神经衰弱和肺结核的治疗。国内外文献对普通灵芝研究很多,对树舌 灵芝的研究报道较少,且对其研究主要集中在树舌多糖和三萜类物质方面。树舌多 糖具有明显的抗肿瘤,提高机体免疫能力的功能;树舌中三萜类成分的含量为:菌 柄>菌盖幼龄暗色层>菌盖老龄白色层>子实体上表层,近年来三萜类物质的分离纯化 及结构测定也得到了深入的研究。但是关于发酵液生物硷的研究几乎没有相关文献 报道。树舌灵芝生物硷成分分析及抗肿瘤活性的测定,可以为树舌灵芝的化学成分 和药用价值的研究提供科学依据。本试验采用酸性醇浸溃的方法,提取树舌灵芝MP-01发 酵液中的生物硷,采用GC-MS方法测定其生物硷的组成成分,并测定了生物硷提取物的 抗肿瘤活性。结果表明树舌生物硷提取物中含有7种生物硷,其中比咯类1种,哌嗪 类1种,酰胺类5种。该生物硷提取物具有体外活性,MTT法证实其对SGC和Hep两种肿 瘤细胞都有抑制作用。对SGC细胞的抑制率达到了50%以上。生物硷提取物对SGC肿 瘤细胞抑制效果较好,而对Hep细胞的抑制作用相对较弱,这可能与肿瘤细胞本身的 特性有关,使得样品对SGC细胞比对H印细胞的毒害作用较大。另外,生物硷提取物对 正常来源的人肝细胞没有明显的毒害作用,因此生物硷提取物通过进一步的临床验 证可作为较好的抗肿瘤药物。
2、树舌灵芝化学成分的初步研究 摘要:对树舌灵芝各溶剂提取物进行化学成分及理化性质的初步研究,结果表明: 树舌灵芝中有甾醇和三萜、挥发油和油脂、内酯、香豆素、有机酸、强心甙、鞣质、 含氧杂环及葸醌类等成分,其中鞣质、含氧杂环及葸醌类成分以前未见报道。 作者:周忠波;马红霞;图力古尔 来源期刊:《塔里木大学学报》2006年 第4期 3、树舌灵芝液体深层发酵菌丝体化学成分研究 作者:刘英杰 硕士论文 (吉林农业大学),长春, 2008 树舌灵芝在分类上隶属于灵芝属,是珍贵的药用真菌。现代医学和药理学的很多研 究表明,树舌灵芝具有提高免疫力、抗肿瘤、抗病毒、抗菌消炎等活性,因此,近 年来对树舌灵芝化学成分的研究越来越引起人们的重视。来自不同产地的树舌灵芝 因受不同地理条件、环境条件等的影响,其化学成分组成及含量有所不同,致使其 药性具有一定差别,为树舌灵芝的实际应用带来困难。为解决这一难题,树舌灵芝 液体深层发酵目前被人们广泛关注。为了给树舌灵芝化学成分的系统研究增添新的 内容,推进树舌灵芝化学成分研究进展,并为其进一步的药理学研究和临床应用研 究奠定基础,本论文在前人研究的基础上,对树舌灵芝液体深层发酵菌丝体的化学 成分做了进一步的研究与探讨。 本文采用专门化的定性方法对菌丝体的化学成分进 行了分析,检测到菌丝体中含有糖类、甾类、萜类、挥发油、有机酸、香豆素及生 物硷类化合物;对测定萜类含量的香草醛-冰醋酸-高氯酸分光光度法进行了优化, 为快速、准确检测树舌灵芝中总三萜类化合物含量提供了可靠、灵敏的检测方法; 通过实验确定的最优测定条件为()(香草醛-冰醋酸)=5%溶液0.2ml,高氯酸0.8ml, 70℃水浴反应20min,冰浴冷却,加冰醋酸5.0ml,测定波长570nm;通过此方法测定 菌丝体和子实体中总三萜类化合物的含量分别为10.40%和23.02%;通过有机溶剂 温浸提取菌丝体的化学成分,采用低温、低醇离心的方法,经硅胶柱层析和大孔树 脂吸附层析对提取物进行分离纯化,通过薄层制备、结晶、重结晶等方法获得4个单 体化合物,经核磁共振谱、紫外、红外等光谱分析鉴定,结合文献,鉴定出三种化 合物:麦角甾醇、甘露醇和赤藓糖醇,其中赤藓糖醇属于首次从树舌灵芝中分离得 到;首次对树舌灵芝菌丝体不皂化物的成分组成进行了分析,采用甲醇-氢氧化钾皂 化法对菌丝体乙醚提取物进行皂化反应,获得不皂化物,应用气质联机进行分析, 结合谱库检索及人工分析鉴定出21个已知化合物和1个未知化合物,主要分为烷烃、 乙酰菲、甾醇和丁羟甲苯这四类,其中丁羟甲苯、乙酰菲、2-溴基十二烷、1-碘代 十八烷和5,6-二氢麦角甾醇均为在树舌灵芝化学成分研究中首次报道。未知化合物 的理化性质及结构目前正在分析中。在不皂化物中甾类化合物和丁羟甲苯的含量非 常高,有研究表明甾类化合物和丁羟甲苯分别具有多种生物活性,二者同时存在于 菌丝体不皂化物中且含量很高,这对不皂化物药理活性的影响需要进一步药理学实 验研究证明,以期为正确评价树舌灵芝液体深层发酵菌丝体的药用价值提供理论依 据,也为其进一步开发利用奠定基础。
4、树舌灵芝活性物质提取及抗肿瘤活性研究 (作者:刘海良) 青岛农业大学硕士学位论文, 2009 (导师:宋爱荣) 摘要:本文主要研究了树舌灵芝多糖的单糖组分和分子量分布,确定了树舌灵芝总 三萜的提取方法,并测定了不同方法提取的树舌灵芝子实体和发酵液总三萜的含量, 以及树舌灵芝生物硷组成及醇溶、醇沉酸性组分,并研究其抗肿瘤活性。本文首先 研究了树舌灵芝多糖提取物单糖组分和多糖分子量分布。结果表明: 树舌灵芝多糖 主要含有甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖及半乳糖5种单糖, 不同样品含其他单糖的种类和含量有所差异。 本文所采用的5个样品分别含有4,4,2,3,3个不同分子量的多糖组分,其重均分 子量分别为793548.95 Da,47375.92Da,642745.1 1 Da,664844.7 Da,678912. 91 Da。 本文研究了树舌灵芝总三萜的测定方法,确定了总三萜的测定的最佳条件为:5%香 草醛.冰醋酸用量0.2 mL,高氯酸用量1.0 mL,70℃水浴25 min。经测定,醇沉 物中三萜含量为0.049 mg/g,而醇溶物中其含量仅为O.022 mg/g。 从树舌灵芝子实体提取三萜的pH条件实验发现:萃取液pH5.00时三萜的含量最高; 发酵:液pH6.00时提取液中三萜的含量最多,可达到0.6mg/mLI,X..k。利用GC. MS对树舌灵芝提取物组分分析结果表明: 树舌灵芝发酵液醇溶物中共检测出7种生物硷,分别为比咯类1种,哌嗪类1种,酰胺 类5种;发酵液醇沉物中共检测出13种生物硷,分别为亚胺类1种,比咯类1种,酰胺 类7种,哌嗪类1种,苯胺1种,咪唑类1种,比嗪类1种。 在醇溶酸性组分提取物中共鉴定出7种成分,其中有机酸1种,酰胺2种,呋喃类 1种,酚类3种;在醇沉酸性组分提取物中共鉴定出11种组分,其中有机酸1种,呋喃 类2种,酚类2种,醇类2种,烯类1种,咪唑类1种,酯类2种。 提取物抗肿瘤研究表明:三个浓度树舌灵芝予实体提取物对H22细胞的抑制率分别达 到了26.28%、61.71%和42.26%(接种一天后给药);7天后给药组,三种剂量梯 度对肿瘤抑制率分别达到了32.44%、48.69%和58.74%。三个浓度树舌灵芝子 实体提取物对S180细胞的抑制率分别达到了15.73%、52.48%和48.51%。三萜 及生物硷提取物对SGC细胞的抑制率都达到了50%以上,醇溶物的三萜提取物在100“g/ mL的抑制率最高,达到了80%以上。三萜和生物硷提取物对Hep细胞的抑制效果,最 高为57.1%;同树舌灵芝粗提物相比,三萜和生物硷提取物的抗肿瘤效果明显高于 树舌灵芝的粗提物。 Abstract In this paper,monosaccharide components and distribution of molecular weight of polysaccharide extraction in Ganoderma lucidum were determined.Results showed:sample 1,2,and 4 contained eight kinds of monosaccharide,while sample 3 contained 1 0 and sample 5 contained 9.Sample 2,sample 4 and sample 5 contained 1 kinds of monosaccharide unknown.All 5 samples contained Man,GIcN,Rha,GlcUA,Glc and Gal,and other kinds of monosaccharide were different.4,4,2,3,3 kinds of polysaccharide components of different molecular weight were separately contained in sample 1-5,with weight-average molar mass separately being 793548.95 Da,47375.92Da,642745.1 1 Da, 664844.7 Da,678912.91 Da. Measurement oftotal triterpene in Ganoderma lucidum Was studied in this paper,and the best reaction condition were made sure as follows:the dosage of 5%vanillin-glacial acetic acid and perchloric acid were 0.2 mL and 1.0 mL,respectively,mixture liquid was reacted at 70℃for 25 min then determined under the wavelength of 520 nm.Determination of Ganoderma lucidum acid showed that the concentration of Ganoderma lucidum acid in ESC Was 0.022 mg/g and in EIC is 0.049 mg/g and average recovery rate Was 96.9%.RSD O. 9%. In extraction solution of different pH of fruit bodies,the pH5 extraction solution contained the most triterpene compounds;while in extraction solution of fermentation in different pH,the pH6 extraction solution contained most triterpene compounds,which concentration could reach up to 0.6mg/mL. Analysed by GC-MS,7 kinds of alkaloid were detected in ESC of fermentation, including one kind of organic acid,two kinds of acylamide,two kinds of furan and three kinds of hydroxybenzene.While 1 3 kinds of alkaloid were detected in EIC,including one imine,,one pyrrole,seven alkenes,one piperazine, one aniline,one imidazole and one pyrazine. Also,Analysed by GC─MS,7 components were detected from ESAC,including one organic acid,two alkene,two furans and three hydroxybenzenes。However,1 1 components were detected in EIAC,including one organic acid,two furans, two hydroxybenzenes,two ethanols,one alkene,one imidazole and two esters. The inhibitory rate on tumor cells H22 of extraction in different three concentrations were26.28%、6 1.7 1%and 42.26%(feed medicine one day after inoculation).However,the inhibitory rate of the three concentrations reached 32.44%、48.69%and 58.74%which were feed medicine 7 days after inoculation.The inhibitory rate on tumor cells S180 ofthe three concentrations were 15.73%、52.48%and 48.51%. The inhibitory rate on SGC cells of triterpene and alkaloid extraction were all up to 50%,with sample 4 concentration 3 having the hi曲est inhibitory rate.While the inhibitory rate of such extraction onHep cells was not good as SGC cells.The highest inhibitory rate only reached 57.1%.Compared the crude extraction of,the inhibitory rate of triterpene and alkaloid extraction Was much better than the crude extraction of. 西部铁杉灵芝 野生树舌灵芝之简单鉴别(照片) |